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色谱分离条件选择中的几个主要方面
1.难分离物质的预测
在分离多组分复杂混合物时，那些份子量级为相近，沸点差极小，结构相似又极性相近的组分，保留值相差小的为难分的物质对。这样可以通过柱系统选择性指标Sd值大小和某些经验规律来预测难分物质对分离的影响，引出Sd值作难分物质的量度，在给定色谱条件下，规定Sd为：
从上式中看到，决定物质对分离难易的不止是r2.1值，而是Sd值，其中主要有热力学因素，K'值影响，同时也有动力学系数β*的影响，Sd等值越小，则物质对就越难分，即此时K'值相差很小，故可将式近似地写为：
想而易见，K'2/K'1比值越小，Sd值就越小，越难分。日常工作中对难分物质对强调有可能，是指可以调整柱温改善热力学性质，几大K'2K'1比值；同时也可改变动力学系数β值（例如，改变流动相线速度，柱长）以达到Sd设定值，使物质对分离，对高效液相色谱也可改变流动相组成，从而改善Sd值，达到同样的目的。
1.同系物种难分物质对的预测
因为同系物种相邻二组分只差一个CH2量，其保留值服从碳数规律：
式中：
NC——同系物种的组成碳数
A1——碳数规律中的经验常数
C1——碳数规律中相关系数，即NC=0时1gVg值。
式中表明，当相差Nc相同时，分子量越大，则lgVg越大，K值越大，越易分离。故同系物中难分离的物质对可能是系类中对组分，即流出柱的分子量小的一对，例如C1-C6烃中，乙烷-乙烯对难分，所以选择的色谱分离条件只要能分离好组分，则其余较大分子量组分对则不成问题。
2.异构体中难分物质对的预测
同分异体中沸点差值小的物质对，可能是难分物质对，其保留变化服从沸点规律
有上式可见，Tb上身，则1gVg值增加，对沸点差值相同的物质对，低沸点者难分离，故非极性或弱极性组分对，在非极性固定相上沸点且差值小的组分对难分离，若对芳烃异构体而言，间对位异构体不但沸点相近，且极性相当，构型相似，故难分离，若用柱系统选择性指标量度，则有：
显然，Sd值决定于沸点差与之比，当△Tb=Tb2-Tb1很小时，“可能”还会得到好的分离，还有改善β*和 K'的可能，毕竟有构型不同的溶解能力差别，同时β*的影响通前述。
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