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1、一般定性
用已知物和直接对照法定性，这是一种相对可靠的方法，主要可以分为以下四种：
1）保留时间和保留体积
2）相对保留值
3）已知物增加峰高法
4）双柱货双体系
实验表明，各类同系物在两根不同柱上的Vg值有如下关系：
式中：VgI表示在柱I上的比保留体积；VGII表示在柱II上的比保留体积；A1与C1为常数。
从上式可以看出，同系物在两个性质不同的色谱柱上，比保留体积Vg的对数有线性关系，下图就是根据某些化合物和领苯二甲酸二异葵酯柱上的比保留体积的对数制作出的。
经过领苯二甲酸二异葵酯柱分离后，在lgvgII为1.8的位置上有一个未知峰，由图可看出有两种可能性，即酮与伯醇；此时，将样品在柱上I上进行分离，得到lgVgII为1.62的色谱峰，从而可确定该峰是酮而不是醇。
在液相色谱中，可用双体系定性，通过改变流动相和固定相，从而改善分离的选择性，通常改用与原色谱体系有较大差别的其他色谱体系来实现分离。
2、保留值分随份子结构或性质变化的规律
1）GC中的碳数规律：同系物间，在一定温度下，保留值变化遵循如下规律：
2）GC中的沸点规律：同族具有相同碳原子数目的同分异构体间存在如下关系：
3)LC中的保留值规则：对于份子中存在不同数目的重复官能团的化合物，有如下的经验公式：
3、反向液谱的定性
在气谱中广泛使用的Kovats指数定性，在夜谱中，由于组分的保留行为不仅与固定相有关，还与流动相的种类及浓度有关，所以不能直接用同系物间，在一定温度下，保留值变化遵循如下规律指数定性。
4、计算机检索
计算机不仅都能贮存大量保留指数，而且还可以将库中标准数据转换为用户色谱条件下保留指数和tR值，靠检索功能定性。
5、色谱中的辅助技术
液相色谱，对于未知物结构的确定，也常常使用一些辅助技术，常用的有质谱，红外，核磁等。
使用非在线联用技术时，首先将色谱分离后的纯样品收集。
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